CCK-8试剂盒的操作步骤和细胞活性检测
CCK-8试剂盒是一种基于WST-8的快速、高灵敏度细胞活性检测的试剂盒，广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性甲臜化合物。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同种类型细胞，颜色深浅与细胞数量在一定限度内呈线性关系。
本试剂盒为即用型溶液，无需再行配制，可直接用于96孔板细胞实验，省略了细胞洗涤与收集等步骤。该试剂盒可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
CCK-8试剂盒的操作步骤：
一、制作标准曲线
1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2.按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。
3.接种后培养至细胞贴壁，然后加CCK-8溶液培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。
4.根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。）
二、细胞活性检测
1.在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（在37℃，5%CO2的条件下）。
2.向每孔加入10μLCCK-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
3.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5.如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板在室温条件下避光保存。在24小时内吸光度不会发生变化。
