缓冲液是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸组成的溶液，通过化学平衡抵抗外来酸碱的加入或稀释引起的pH变化，维持溶液酸碱度稳定。其核心原理是弱电解质的电离平衡动态调节，缓冲容量（抵抗pH变化的能力）取决于弱酸/碱的浓度及其解离常数（pKa）。
缓冲液（如试剂盒中的缓冲液、反应缓冲液）通过“酸碱中和”机制，将检测体系的pH值稳定在最佳范围：
荧光探针法：DCFH-DA与ROS的氧化反应需在弱酸性至中性环境（pH7.0-7.4）进行，PBS缓冲液（pH7.2）可精准维持该范围，避免pH偏差导致荧光信号减弱或假阳性；
比色法：亚铁离子与H₂O₂的反应（生成铁离子-二甲橙复合物）需在pH4.0-5.0的酸性缓冲液中进行，缓冲液可防止体系pH波动导致显色不均，确保吸光度与ROS浓度呈线性关系。
若缺乏缓冲液，样品自身的pH差异（如细胞培养液pH7.2、组织匀浆pH6.8）或反应过程中产生的酸性/碱性物质（如ROS氧化产物）会破坏体系pH，直接导致检测结果偏差。
