酶联免疫吸附实验（ELISA，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学检测方法，广泛应用于生物医学研究、疾病诊断以及食品安全检测等领域。其基本原理是通过抗原与抗体的特异性结合，并利用酶促反应产生可测量的信号，进而定量或定性分析样本中目标物质的含量。
1. 实验原理
ELISA的核心原理基于抗原和抗体的特异性结合。通常，抗原（如病原体的蛋白质、激素等）与相应的抗体结合，而该抗体上连接着一种酶。通过加合适的底物，酶会催化底物转化为有色产物，产物的颜色变化可通过分光光度计或酶标仪检测，进而推算目标物质的浓度。
2. ELISA的类型
ELISA常见的类型有以下几种：
直接法ELISA：在固相支持物（如96孔板）上固定已知的抗原或抗体，通过加入样本中的抗体或抗原并检测酶标记物的反应进行定量。
间接法ELISA：通过先固定抗原，再加入含有抗体的样本，再通过二次抗体与酶标记物结合，增强信号。
夹心法ELISA：适用于大分子抗原，利用两种不同的抗体对抗原进行捕捉和检测，增强了检测的特异性和灵敏度。
竞争法ELISA：样本中的抗原与标记抗原竞争与固定抗体结合，结合情况与样本中抗原的浓度成反比。
3. 优势与应用
ELISA具有多种优势，如高灵敏度、特异性强、操作简便、成本相对较低等。它可以检测血清、尿液、唾液等体液中的抗体、抗原、激素等多种生物分子，广泛应用于免疫学研究、疾病诊断（如病毒检测、肿瘤标志物检测等）、疫苗开发、食品安全等领域。
