马生长激素(GH)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在马生长激素(GH)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
12637 胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 Receptor (GLP1R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12638 接触蛋白1(CNTN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin 1 (CNTN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12639 蛋白激酶Cα(PKCα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Alpha (PKCa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12640 Corin蛋白(CRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corin (CRN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12641 含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sclerostin Domain Containing Protein 1 (SOSTDC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12642 过氧化还原酶2(PRDX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxiredoxin 2 (PRDX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12643 核仁磷酸蛋白(NPM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleophosmin (NPM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12644 白介素23受体(IL23R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 23 Receptor (IL23R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12645 脂酰转移酶(LCAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12646 抑丝蛋白1(PFN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Profilin 1 (PFN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12647 核仁素(NCL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolin (NCL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12648 染色框同源物3(CBX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chromobox Homolog 3 (CBX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12649 核糖体蛋白L6(RPL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribosomal Protein L6 (RPL6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12650 Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bcl2/Adenovirus E1B 19kDa Interacting Protein 3 (BNIP3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12651 肝细胞癌相关蛋白1(HCRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepatocellular Carcinoma Related Protein 1 (HCRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12652 顺乌头酸酶1(ACO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aconitase 1 (ACO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12653 阿片肽(OP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Opioid Peptide (OP) 48T/96T General
12654 促肾上腺皮质素释放激素结合蛋白(CRHBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone Binding Protein (CRHBP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12655 瘤变抑制因子14(ST14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Suppression Of Tumorigenicity 14 (ST14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12656 分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 4 (SFRP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12657 沉默调节蛋白4(SIRT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sirtuin 4 (SIRT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12658 正五聚蛋白3(PTX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pentraxin 3, Long (PTX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12659 乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Breast Cancer Susceptibility Protein 2 (BRCA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12660 血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 3 (VEGFR3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12661 肉毒碱棕榈酰基转移酶2(CPT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnitine Palmitoyltransferase 2, Mitochondrial (CPT2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12662 透明质酸介导运动因子受体(HMMR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hyaluronan Mediated Motility Receptor (HMMR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12663 血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12664 封闭蛋白9(CLDN9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 9 (CLDN9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12665 转酮醇酶(TKT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transketolase (TKT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12666 含碱性螺旋环螺旋域蛋白B8(BHLHB8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Basic Helix Loop Helix Domain Containing Protein B8 (BHLHB8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12667 髓鞘关联糖蛋白(MAG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myelin Associated Glycoprotein (MAG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12668 Duffy血型趋化因子受体(DARC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Duffy Blood Group Chemokine Receptor (DARC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12669 X-框结合蛋白1(XBP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1) 马生长激素(GH)ELISA试剂盒48T/96T Homo sapiens (Human)
12670 牛痘相关激酶1(VRK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vaccinia Related Kinase 1 (VRK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12671 细胞色素P450家族成员24A1(CYP24A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 24A1 (CYP24A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不;洗板针堵塞,抽吸不;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5马生长激素(GH)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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