层析柱（色谱柱）吸附介质的充填及洗脱规程

　　一、柱头安装是否合适及是否严密的检查

　　1、检查下柱头是否按图纸要求安装?（要求按图纸要求安装）

　　2、检查下柱头内，是否安装了防止吸附剂（例如硅胶）漏出的滤布（或滤网）。

　　3、所用滤布（滤网）的材质要求能耐所用溶剂的腐蚀，而且孔径很小，一般要求使用500目以上孔径大小的滤布（网）。

　　4、下柱头安好，紧固后，从柱上端（开口）加入所用洗脱剂中极性较小的一种溶剂（例如已烷、石油醚、甲苯等），使溶剂液面比下柱头上部分离出20-30厘米，仔细观察下柱头是否漏溶剂。如果漏，则必须坚固（或重装），直至不漏为止。

　　5、检查确实不漏后，放出柱内溶剂，准备装吸附剂（例如硅胶等）。

　　二、充填吸附剂

　　以充填（或称装填）硅胶为例，作如下说明：

　　1、 干法装柱

　　①、取吸附剂（例如硅胶）记下硅胶的量，（等装完柱后，检查剩余硅胶量，就可以知道装入柱中的硅胶量了）。

　　②、工作人员戴上口罩，准备好木槌，有人从柱上端倒入一定时的硅胶，柱下边有人用木槌敲击柱外壁，振实硅胶；一边加硅胶，一边敲击柱；硅胶加到什么高度，就在此高度敲击；且向上下移动敲击。如此，直至硅胶装满时为止；再上下移动敲击一阵子；至硅 胶上平面不再下沉，而且硅胶面很实时为止。

　　③、如果体系中没有设预柱，层析柱中上端硅胶不把装满，留出空间待“上样"用。

　　④、如果有预柱的体系，层析柱应装满硅胶。

　　⑤、干法装柱，粉尘大，且敲击声大，柱外表易变成不光亮，但不耗溶剂。

　　2、湿法装柱

　　①、同上，准备一定时的硅胶，且记录下硅胶量。

　　②、准备一只30-50升的耐溶剂腐蚀的塑料桶，例入极性小的且配洗脱剂时需用的溶剂（例如已烷，石油醚、甲苯等），再例入硅胶，搅拌混合。再将此浆液倒入（或用勺舀）层析柱中。 这样，一次次倒入后，柱内浆液面上升到柱上部；再将柱下端出液管通过一缓冲 罐与真空系统接通（事先接好）。开关真空，使柱上端浆液慢慢下降，再不断补浆液（使硅胶面总是在液面下，这样柱中几乎没有空气），直至装满。再不断开真空抽液，不断从柱上端加入溶剂，直至硅胶面基本不降为止。

　　③、湿法装柱，有一部分溶剂损耗，且溶剂气味大，环境不佳；但粉尘少，且不伤柱的外表面。

　　④、干法装的硅胶量，有可能比湿法装得稍多一点