细胞凋亡是细胞自主调控的程序性死亡过程,在肿瘤、免疫、药理等方向的基础研究中,细胞凋亡水平是评估药物作用、细胞稳态的核心指标,流式双染法是当下实验室常用的定量检测手段。Elabscience 伊莱瑞特推出的 E-CK-A211 Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒,依托成熟的双标记体系,适配常规流式细胞仪完成细胞凋亡分群检测,下面结合产品原理、实操要点与储存管理展开技术交流。
武汉伊莱瑞特生物成立于 2011 年,坐落于武汉光谷生物城,企业集研发、生产、质检于一体,搭建标准化试剂生产车间,产品经过多层质控流程,供应全球多地科研实验室,试剂盒产品适配细胞生物学、免疫学相关课题研究,已有多篇高分期刊文献引用该系列试剂盒开展细胞凋亡相关实验。
试剂盒检测
细胞凋亡的核心逻辑依托两种荧光染料的特性搭配。Annexin V 属于钙离子依赖型磷脂结合蛋白,可特异性结合凋亡早期外翻至细胞膜外侧的磷脂酰氨酸,标记 FITC 荧光后,激发波长 490nm、发射波长 530nm,用于标记早期凋亡细胞;PI 为核酸染料,无法穿透完整活细胞膜,仅能进入膜破损的晚期凋亡与坏死细胞,结合双链 DNA 后产生红色荧光,二者联用可清晰区分活细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡及坏死细胞三类群体。
整套检测流程耗时约 40 分钟,仅需自备 PBS 缓冲液与去离子水即可开展实验。收集细胞时需要同步收取培养体系中漂浮的脱落细胞,避免丢失大量凋亡细胞造成数据偏差;消化、吹打、离心操作动作保持轻柔,降低机械损伤带来的假阳性结果;染色全程避光孵育,完成染色后一小时内上机检测,保障荧光信号稳定。实验过程中需设置空白细胞、单染管、阴性与阳性对照,完成荧光补偿调节,减少光谱串扰对细胞凋亡分群判断的干扰。
产品规格为 20 次检测用量,现货供应,运输全程搭配冰袋低温配送,日常存放需置于 2 至 8 摄氏度避光环境,未开封状态下有效期可达 12 个月。日常使用后及时密封避光放回冷藏,避免反复温差、强光照射造成荧光标记物失活,延长试剂使用周期。整套试剂操作门槛低,无需固定、透化等复杂前处理,适配贴壁、悬浮各类细胞样本,为实验室批量开展细胞凋亡定量分析提供稳定可行的实验方案。