在免疫学动物模型研究中,从小鼠脾脏、淋巴结样本中分离状态完好的 CD4+、CD8+T 细胞,是开展细胞功能、免疫应答相关实验的前置步骤,磁珠分选凭借操作温和、流程简便的特点,成为实验室常规选用的细胞纯化手段。本文结合 EasySort?系列小鼠 T 细胞阴性分选试剂盒,分享磁珠分选阴性策略的技术逻辑、产品适配特性与日常使用、储存维护相关实操经验。
提供该系列分选试剂盒的武汉伊莱瑞特生物成立于 2011 年,坐落于武汉光谷生物城,是具备完整抗体、蛋白研发生产平台的生物试剂企业,产品通过 ISO9001 与欧盟 CE 相关认证,试剂品类覆盖免疫检测、细胞分离等多个研究方向,可适配全球多地区实验室的基础科研需求。本次介绍的 MIM002N 小鼠 CD4+T 细胞阴性分选试剂盒与同系列 CD8+T 细胞分选试剂盒,均采用磁珠阴性分选思路设计。
磁珠分选阴性分选的核心逻辑,是利用混合抗体磁珠标记样本内除目标 T 细胞外的其余杂细胞,在外置磁场作用下吸附带有磁珠标记的杂细胞,流出体系的细胞即为未被抗体结合的 CD4 + 或 CD8+T 细胞。相较于阳性分选,阴性模式不会在目标细胞表面留存磁珠与抗体,能降低外源标记对细胞活化、增殖、分化等下游实验的干扰,适配细胞共培养、过继转移、细胞因子检测等多种后续研究场景。
试剂盒适配小鼠脾脏与淋巴结两类常见样本,单次反应体系可处理 1×107 个原始细胞,分为 10 Assays 与 100 Assays 两种规格,可根据实验室常规样本量灵活选择,货品多为现货供应,运输全程搭配冰袋低温配送。试剂日常储存需放置在 2 至 8 摄氏度避光环境,全程避免反复冻融,在规范保存条件下有效期为十二个月。
实操过程中,先将小鼠组织研磨过筛制备单细胞悬液,调整细胞浓度后加入试剂盒配套的杂细胞抗体混合液孵育,再投入链霉亲和素修饰磁珠完成标记,随后将混合悬液置于分选磁场中静置,收集流出液即可得到纯化 T 细胞。实验全程建议使用预冷分选缓冲液,缩短孵育与磁分离时长,以此维持细胞活性。日常存放试剂时,需定期检查冰箱温控状态,若试剂出现浑浊、沉淀异常,不建议继续用于分选实验,避免影响细胞纯度。
整套磁珠分选流程无需复杂大型设备,单人即可完成批量样本处理,分离所得细胞可直接用于下游各类体外、体内实验,能够满足基础免疫学实验室稳定、高频的细胞分离需求。