叶绿素测定仪的实验步骤介绍

    叶片是植物的重要器官之一，其之所以呈现为绿色，是因为叶片含有丰富的叶绿素含量，叶绿素是植物进行光合作用的主要色素，通过使用叶绿素测定仪对叶绿素含量进行测定，我们可以判断植物的长势以及其需氮肥情况。那么它是如何进行测定的呢？下面内容介绍叶绿素测定仪的实验步骤。

    1、取新鲜植物叶片（或其它绿色组织）或干材料，擦净组织表面污物，剪碎（去掉中脉），混匀。

    2、称取剪碎的新鲜样品0.2g，共3份，分别放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及2～3ml95%乙醇，研成均浆，再加乙醇10ml，继续研磨至组织变白。静置3～5min。

    3、在使用叶绿素测定仪进行测量过程中，取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。

    4、用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至25ml，摇匀。

    5、把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇为空白，在波长665nm、649nm下测定吸光度。

    6、然后将叶绿素测定仪测定得到的吸光值代入公式，就可以得到叶绿素a和叶绿素b的浓度，二者之和为总叶绿素的浓度。最后根据以下公式计算出植物组织中叶绿素的含量。叶绿素的含量（mg/g）= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重（或干重）。