2026年05月29日 10:09:57 来源:智造先锋 >> 进入该公司展台 阅读量:5
一、TLX DNA建库试剂盒产品组分
- TLX Buffer Mix
- TLX Enzyme Mix
- TLX ligase Enzyme
- TLX ligase Buffer
- TLX Adapter for ILM
- PCR Master Mix
二、TLX DNA建库试剂盒使用方法
- 磁珠: Cat#A63881,AMPure XP Beads 或其他等效产品。
- DNA 质 控:Cat#Q33238,life qubit4.0;Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer 或 其 他等效产品。
- 其他材料:Nuclease-free water、低吸附 EP 管、无水乙醇、TE Buffer(10 mM TrisHCl,pH 8.0-8.5+0.1 mM EDTA)、磁力架、PCR 管、PCR 仪等。
三、实验步骤
片段化 / 末端修复 / 加 A 尾(Fragment/End Preparation/dA-Taling)
1、将所需试剂解冻后,颠倒混匀,置于冰上备用。
2、于无菌 PCR 管中配制下表所示反应体系。
3、吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液离心至管底。
4、按下表设置反应程序(热盖设置为 82℃),将上述 PCR 管置于 PCR 仪中反应。
表 1. 片段化 / 末端修复 /dA 尾反应体系
表 2. 片段化 / 末端修复 / 加 dA 尾反应程序
接头连接(Adapter Ligation)
1、将所需试剂解冻后颠倒混匀,置于冰上备用。
2、如下表所示配制反应体系。
表 3. 接头连接反应体系(接头详细说明见注意事项 二)
3、吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液离心至管底。
4、将上述 PCR 管置于 PCR 仪中 22℃,孵育 60min。
【注】:当投入 DNA 量较低,实验效果不理想时,可尝试将连接时间延长。