凝胶渗透色谱的核心原理是基于分子尺寸大小的分离机制。它使用具有多孔结构的凝胶作为固定相，当样品溶液通过色谱柱时，不同分子量的高分子化合物会因体积差异而表现出不同的渗透能力。较大的分子无法进入凝胶颗粒的小孔，只能沿着颗粒间的间隙流动，因此路径较短、流速较快；而较小的分子可以渗入更多毛孔内部，导致其流动路径更长、速度更慢。这种差异使得大分子先被洗脱出来，小分子后出峰，从而实现按分子量从大到小的顺序依次分离。
分配与流动过程：样品溶解于适当溶剂后注入色谱柱，在流动相(通常为有机溶剂)推动下穿过填料。由于不同大小的分子在多孔介质中的扩散深度和滞留时间不同，形成与分子体积相关的保留时间分布。这一特性特别适用于分析聚合物、蛋白质等大分子物质的分子量分布及结构特征。
校正与定量分析：通过已知标准品建立校准曲线，可将保留时间转换为对应的分子量数值，进而准确测定样品中各组分的含量比例。该技术还支持普适校正方法，提高了跨实验室数据的可比性。
1.前期准备与样品溶解
-选择合适溶剂：根据样品性质选取能溶解它的流动相，如THF、DMSO或水相等；
-配制溶液：将适量样品溶于所选溶剂中，确保均匀无颗粒物残留，必要时进行过滤处理以避免堵塞色谱柱。
2.仪器开机预热：启动设备后等待系统稳定，包括泵、检测器等组件达到工作状态。
3.基线校准：注入空白溶剂作为参比，建立稳定的基线信号，用于后续数据分析时的扣除背景干扰。
