QX200数字PCR仪是一种用于预防医学与公共卫生学领域的医学科研仪器。它是目前先进的核酸定量技术,数字PCR也是目前核酸分子检测中灵敏、先进的检测分析平台,根据泊松分布原理将整个反应体系制备成数以万计的独立的纳升级微滴内,每一个微滴就是一个稳定的PCR基因扩增体系,然后对每个微滴的荧光信号进行收集,有扩增的记为“1”,无阳性扩增的记为“0”,通过泊松分布对试验结果进行浓度的绝对计算。
一、核心组成
QX200数字PCR系统由微滴生成仪和微滴分析仪两部分组成:
1.微滴生成仪:将含有核酸样本的20µl反应体系分割为约20,000个纳升级的独立微滴,每个微滴单独进行PCR扩增。
2.微滴分析仪:配备发光二极管光源与多像素光子计数器,通过双色荧光检测系统(FAM/EvaGreen和HEX/VIC通道)逐个分析微滴的荧光信号,依据泊松分布原理计算目标核酸分子的绝对拷贝数。
二、QX200数字PCR仪应用领域
1.新一代测序(NGS):直接对NGS文库进行绝对定量分析,优化测序数据质量。
2.基因表达分析:可靠检测少量mRNA和miRNA的细微变化,支持差异表达研究。
3.环境监测:检测土壤、水等环境样品中的微生物群落,评估污染程度。
4.食品检测:评估转基因生物体(GMO)含量,保障食品安全。
三、基本功能:
QX200数字PCR仪可将反应体系制备成上万个微滴,将极大的降低高背景分子对低丰度靶标分子扩增的影响,结果分析采用终点法,提高反应体系对复杂样本中抑制剂的耐受度,主要用于下述研究:
1.miRNA/lncRNA/DNA甲基化绝对定量分析;
2.无需标准曲线的绝对定量分析;
3.稀有突变/核酸检测,可以检测到10万分之一的稀有事件;
4.复杂样本中靶标分子的检测,最小检测复杂样本中低至1个拷贝的核酸分子;
5.表达量改变≤10%的的基因检测;
6.动植物转基因拷贝数变异检测;
7.单细胞核酸分子检测;
8.高抑制剂的土壤、植物样本核酸分子检测。
