例2、 

①_√    ②_√       ③_√   ④    ⑤         

①^／_√   ②^／_√   ③^／_√  ④^／   ⑤^／ 

①＂_√  ②＂_√  ③＂  ④＂_√ ⑤＂       

即  

则此生长指标为321，级数为1。查三次重复计数表。321对应的细菌量为15个/ml。此系列结果为：15×10¹=150个/ml。

例3、

①     ②_√        ③     ④   ⑤        

①^／_√   ②^／_√  ③^／_√   ④^／   ⑤^／         

①＂   ②＂   ③＂    ④＂  ⑤＂      

  即 

则此生长指标为121，级数<0。查三次重复计数表。121对应的细菌量为1.5个/ml。此系列结果为：≤1.5×10⁰既≤1.5个/ml。

例4、  ①_√     ②_√         ③_√   ④_√   ⑤_√                 

①^／_√    ②^／_√   ③^／_√  ④^／_√  ⑤^／_√  即          

①＂_√   ②＂_√   ③＂_√ ④＂   ⑤＂              

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简易细菌测试瓶使用说明

谢谢使用我公司出品的产品，请在使用前仔细阅读该使用说明手册。

一、             产品品种：

石油烃氧化菌测试瓶(HDB)

细菌总数测试瓶（BT）

大肠菌群测试瓶（TCB）

腐生菌测试瓶（TGB）

铁细菌测试瓶（FEB）(TEB)(FB)

硫酸盐还原菌测试瓶（SRB）

二、方法原理：

        采用绝迹稀释法，即用将待测定的水样逐级注入到测试瓶中，进行接种稀释后，置于培养箱培养，根据测试瓶阳性反应和稀释的倍数，计算出水样中细菌量总数。

三、操作步骤：

        ① 将同一品种测试瓶排成一组，依次编上序号（按照估计的细菌量确定测试瓶个数，建议参考数值为：X×10⁰的细菌量用３个测试瓶、X×10¹的细菌量用４个测试瓶、X×10²的细菌量用５个测试瓶、X×10³的细菌量用６个测试瓶）。

做二个平行样重复试验时应排为二组；做三个平行样重复试验时应排为三组。

       ②用取1ml代表性水样（采样方法依据GB/T12997-1991、GB/T12998-1991、GB/T12999-1991、GB/T14581-1993的规定进行）注入1号瓶内稀释，充分振摇，待用（平行样亦按此操作，下同）；

1

      ③ 用另一支从1号瓶内抽取1ml经充分振摇后的水样注入2号瓶内稀释，充分振摇，待用；

       ④ 再用一支从2号瓶中内抽取1ml经充分振摇后的水样注入3号瓶内稀释，充分振摇，待用；

       ⑤依次类推稀释直到一瓶为止，待用。

       ⑥ 将上述所有稀释过的测试瓶放入恒温培养箱中培养，按表１进行细菌生长的鉴别。

表１　　细 菌 生 长 的 鉴 别 方 法

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细菌测试瓶测试方法及结果示例

例、做三个平行样重复试验，每个样稀释5个梯度：

      ①    ②    ③    ④    ⑤

①^／   ②^／   ③^／   ④^／   ⑤^／

①＂  ②＂  ③＂  ④＂  ⑤＂

即分别在① ①^／①＂号瓶中注入1ml水样，摇匀后取出  1ml再分别注入② ②^／②＂号瓶中；摇匀后取出1ml再分别注入到③③^／③＂号瓶中，依次类推，直至⑤ ⑤^／⑤＂号瓶。

在恒温下放置一定时间后（大肠菌群37℃，24小时）观察测试瓶阳性（变色）反应个数。

例1、（打√者为阳性反应---以+表示）    

      ①_√    ②      ③    ④    ⑤           

①^／_√   ②^／_√   ③^／_√  ④^／   ⑤^／      

①＂_√  ②＂_√  ③＂  ④＂  ⑤＂  

即

则此生长指标为321，级数为0。查三次重复计数表。321对应的细菌量为15个/ml。此系列结果为：15×10⁰=15个/ml。

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示例３

①　　②　　③　　④　　⑤

+ + - + -

+ + + - -

生长指标：　　　　２　　１　　１

级　　数：　１０^１ （②－１＝１）

示例４

①  ②  ③  ④  ⑤

-   +   -  -   -

+ - + - -

生长指标：１　 １　１

级　　数：　１０^０

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四、细菌量计量：

１．在一定温度下培养一定时间后，按瓶号列出稀释梯度，并根据细菌瓶阳性反应的个数，确定生长指标和级数（参见附录及示例）．

２．根据生长指标查表２或表３，确定细菌量基数并乘以级数，即为细菌量总数。

细菌量总数＝细菌量基数×级数

二组平行样重复试验查表２

三组平行样重复试验查表３

3、细菌量总数结果示例见表４

五、注意事项

1、测试瓶中若有白色沉淀为过量营养成份，属正常现象，不影响测试。

2、常温条件下，测试瓶储存有效期为一年。

3、测试瓶经稀释后，一定要用力振摇1~2分钟，以保证测试结果的准确性。

4、上述操作步骤中抽取和注入1ml水样适用于10ml规格的测试瓶。

表２  二 次 重 复 细 菌 量 基 数 表

3

表３    三 次 重 复 细 菌 量 基 数 表

表４  细 菌 量 总 数 结 果 报 告 示 例 表

                          4

附录

一、                                                                                                                                              生长指标的确定原则．

１．全部呈阳性反应的一列平行样应为生长指标的位数．

２．同一平行样，有Ｘ个阳性反应瓶，生长指标即为Ｘ．

二、级数的确定原则

１．全部呈阳性反应的一列平行样的瓶号数减去１，即为级数ｎ，以１０^ｎ表示．

２．１号瓶的２或３个平行样未全部发生阳性反应时，级数为０，即为１０^０

示例１

①   ②   ③   ④   ⑤

+     -    -   -    -

+    +    -    -   -

+     +    +   -    -

生长指标：　３　　２　１

级　　数：　１０^０ （①－１＝０）

示例２

            ①   ②   ③   ④   ⑤

            +    +    +    -    -

            +    +    +    -    -

            +    +    +    +    +

生长指标：　　　　　３　　１　１

级　　数：　１０^２ （③－１＝２）

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即

则此生长指标为312，级数为2。查三次重复计数表。312对应的细菌量为11.5个/ml。此系列结果为：11.5×10²个/ml。

例5、①_√   ②_√        ③_√   ④_√   ⑤_√           

①^／_√   ②^／_√  ③^／_√  ④^／_√  ⑤^／_√             

①＂_√  ②＂_√  ③＂_√ ④＂_√ ⑤＂

                  +   +  +   +

           即     +  +   +   +

                  +   +  +   +

                      3   0   0

则此生长指标为300，级数为4。查三次重复计数表。300对应的细菌量为2.5个/ml。则此系列结果为≥2.5×10⁴个/ml。

注意事项：

① 做几个平行样对应查几次重复计数表（即生化检测方法中的MPN表）。

② 计算公式为：瓶号数-1=级数n，即在结果后应 ×10ⁿ。

如 1号瓶级数为0级，即在结果后×10⁰；

 2号瓶级数为1级，即在结果后×10¹；

3号瓶级数为2级，即在结果后×10²；

③ 全部阳性反应的一列应为生长指标的第1位数。

如例1中的生长指标第1位数3对应① ①^／①＂号瓶

例2中的生长指标第1位数3对应② ②^／②＂号瓶

例4中的生长指标第1位数3对应③ ③^／③＂号瓶依次类推。

④ 如果列（① ①^／①＂号瓶）未全部发生阳性反应，结果应注明“≤”，如例3；如果至一列（⑤ ⑤^／⑤＂号瓶）全部发生阳性反应，结果应注明“≥”，（如例5）。此情况下说明细菌量大，应

                             9

增加测试瓶的个数，以求得较准确的结果。

⑤ 测试瓶注入水样（稀释）后应用力振摇，以保证结果的准确性；逐级稀释水样时，应更换，以保证结果的准确性。

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简易细菌测试瓶

使

用

说

明

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